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        抗體稀釋液和ELISA相關溶液的配制
      2. 發布日期:2010-02-21      瀏覽次數:4505
        • 上海聯碩生物科技有限公司

          抗體稀釋液和ELISA相關溶液的配制

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          1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS
            

           NaH2PO4·2H2O

          0.39

          Na2HPO4

          1.27

          NaCl

          0.85

          NaN3

          200mg

          H2O(蒸餾水)

          至    1000ml

          2ELISA洗液及HRP標記抗體稀釋液PH7.4PBST 

          NaCl

          2.0

          KH2PO4

          0.2

          Na2HPO4·12H2O

          2.9

          KCl

          0.2

          NaN3

          0.2

          H2O

          至    1000ml

          吐溫(Tween20

          0.5ml

            4°C保存備用

          3、包被液(簡稱CBpH9.6  

          Na2CO3

          1.59

          NaHCO3

          2.93

          NaN3

          0.2

          H2O

          至    1000ml

            密封蓋好,4°C存放備用

          4、ELISA底物液(可溶性底物)
            

          磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0

           

          0.1mol/L檸檬酸(21.014/100ml)

          24.3ml

          0.2mol/L Na2 HPO428.4/1000ml)

          25.7ml

          H2O

          50ml

            4°C存放備用

          5DAB底物液(不溶性底物,組化病理等)
            

          0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

           

          Tris

          6.05

          HCL(36%)

          3.15克(約2.7mlHCL

          H2O

          至                            1000ml

          DAB3´3´二氧基聯苯胺,不溶性底物,呈棕紅色

          6、DAB溶液配制:(組化及Western blot 顯色)
           DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀,過濾后使用,一般新鮮配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%,混均后使用。 7、3´,3´,5´5´,-四甲基聯苯胺(TMB)溶液配制:
           用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或無水乙醇,將TMB配成1%濃度,4°C保存半年以內使用。使用前,用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul,混勻后立即使用。2N H2SO4終止后,450nm測定OD值。 

          8、1%離子瓊脂膠配制液
              作免疫雙相擴散,單相擴散及免疫電泳中使用。
             0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液  

          巴比妥鈉

          23.8

          1mol/L HCL

          34.5ml

          H2O

          2150ml


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