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        125I標(biāo)記物的純化
      2. 發(fā)布日期:2011-10-24      瀏覽次數(shù):1225
        • 125I標(biāo)記物的純化

           

              125I標(biāo)記物反應(yīng)后,標(biāo)記物需進(jìn)行分離純化以除去游離125I-和其他雜質(zhì)。純化標(biāo)記物的方法有利用分子篩機(jī)制的凝膠過(guò)濾法、利用游離125I-與標(biāo)記物分子極性差異進(jìn)行吸附解離的離子交換層析法、按分子所帶電荷和直徑不同在電場(chǎng)作用下分子遷移速率不同進(jìn)行分離純化的聚丙烯酰胺凝膠電泳法(PAGE)以及液相色譜法(HPLC)

           

              以葡聚糖凝膠SephadexG-50)柱層析分離純化125I標(biāo)記物為例:標(biāo)記反應(yīng)混合液經(jīng)柱層析時(shí),需定時(shí)或定量逐管收集層析洗脫液,并用丁計(jì)數(shù)儀測(cè)定每管的放射性強(qiáng)度。通常zui先洗脫出的為聚合物雜質(zhì)放射峰,然后為含標(biāo)記物的主放射峰,隨后即為游離125I-峰。

          125I-標(biāo)記物柱層析分離純化示意圖

          .損傷和聚合標(biāo)記物;125I標(biāo)記物;.游離125I-

           

              標(biāo)記物貯存一段時(shí)間后可因脫碘和自身輻射造成蛋白質(zhì)破壞形成碎片,因而需對(duì)標(biāo)記物重新純化。

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