<span id="bsz3i"><optgroup id="bsz3i"></optgroup></span>

        <span id="bsz3i"></span>
      1. 產(chǎn)品分類
        您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 抗體純化方法及實驗步驟
        抗體純化方法及實驗步驟
      2. 發(fā)布日期:2023-05-31      瀏覽次數(shù):680
        • 1.鹽析法(飽和硫酸銨沉淀法)

          該純化方法是基于在待純化免疫血清中加入飽和硫酸銨溶液,由于抗體也是一種蛋白質(zhì),其在水溶液中的溶解度是由其本身攜帶的親水基團數(shù)和電荷數(shù)決定的,當(dāng)我們向抗血清中加入飽和硫酸銨溶液后,硫酸根離子和銨根離子與抗體競爭溶液中的水分子,因為硫酸根離子和銨根離子與抗體分子相比,具有更強的親水性,因此抗體分子表面的水化膜被破壞,同時其暴露出來的帶電基團被溶液中的鹽離子所中和進而導(dǎo)致其溶解度大大降低,依據(jù)此原理從而將其從抗血清中分離。


          2.正辛酸-飽和硫酸銨沉淀法
          該純化方法原理是:正辛酸在偏酸條件下,能與抗血清中或者小鼠腹水中的雜蛋白結(jié)合,在等電點附近將其沉淀,IgG類抗體則存在于上清液中,再利用飽和硫酸銨沉淀法即可進一步提純。


          3.Protein A和protein G純化法
          基本原理:protein A和proteiin G 可以和抗體IgG分子的Fc段特異性結(jié)合。Protein A和proteinG 作為配基可以被偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠上,當(dāng)抗血清從中流過時,特異性的IgG就與配基結(jié)合,其他雜蛋白則穿流而過。因兩種蛋白純化抗體時對不同宿主的抗體的結(jié)合能力不同,我們需要具體情況具體對待,分別選擇protein A 或者protein G,或者是protein A/protein G組合。一般推薦小鼠單抗IgG2a,IgG2b,IgG3,兔,人,豬的多克隆抗體用protein A純化,而小鼠單抗IgG1, 大鼠單抗,小鼠,大鼠,山羊的多克隆抗體則選擇用protein G純化。


          4.免疫親和純化法
          基本原理:將抗原作為一種配基偶聯(lián)在sepharose 4B上,血清等生物液體中的特異性抗體與sepharose 4B上的抗原進行特異性結(jié)合,其他雜蛋白和雜抗體則不被結(jié)合,通過洗滌和洗脫等一系列實驗步驟即可得到高純度的目標(biāo)抗體。本方法雖然和Protein A/G均被稱為親和純化方法,但是純化得到的最終的抗體還是有很大區(qū)別的,ProteinA/G純化得到的主要是非特異性的IgG類抗體,而本方法純化得到的主要是特異性的IgG類抗體,與其他純化方法相比,本方法純化得到的抗體其特異性,純度最高。本純化方法的實驗步驟與protein A/G純化方法基本一致,將實驗方法三的配基protein A/G換成相應(yīng)的目標(biāo)抗原即可。

        主站蜘蛛池模板: 欧洲乱码伦视频免费国产| 亚洲熟妇色自偷自拍另类| 羞羞漫画小舞被黄漫免费| 成全影视免费观看大全二| 国产亚洲精aa在线看| 成人免费a级毛片| 亚洲熟女www一区二区三区| 最近2019中文字幕mv免费看| 亚洲熟妇久久精品| 国产无遮挡色视频免费视频| 国产精品亚洲专区无码WEB| 国产精品免费看久久久久| 色屁屁www影院免费观看视频| 亚洲A∨午夜成人片精品网站| 午夜在线免费视频| 亚洲人成人网站色www| 久久不见久久见免费视频7| 国产精品亚洲片夜色在线| 日韩免费毛片视频| 成人免费网站久久久| 亚洲国产精品无码久久久蜜芽| 久久精品乱子伦免费| 亚洲人成人网毛片在线播放| 国产免费av片在线无码免费看 | 久久亚洲av无码精品浪潮| 3344在线看片免费| 亚洲欧洲日韩在线电影| 国产猛烈高潮尖叫视频免费| 成年女人A毛片免费视频| 亚洲综合视频在线观看| 精品免费国产一区二区三区| 一区二区视频在线免费观看| 亚洲AV成人片色在线观看高潮| 最近2019中文字幕免费看最新| 久久九九免费高清视频| 亚洲最新在线视频| 免费A级毛片无码久久版| 久久99国产乱子伦精品免费| 久久久亚洲精华液精华液精华液| 亚洲熟妇av一区二区三区漫画| 亚色九九九全国免费视频|