1. 吸附法
優點：做作條件溫和、簡便；成本低；載體可反復使用
不足：對離子強度、pH、溫度等因子敏感，故酶易損漏，且酶轉載容量較小

2.共價偶聯法
優點：載體與酶偶聯的方法多樣化；固定化的酶非常穩定，損漏少
不足：偶聯試劑對生命組織多有一定毒性；偶聯條件激烈，易引起酶失效；成本較高

3.交聯法
優點：可用的交聯試劑多，技術簡易；穩定性較高
不足：交聯條件較激烈，常出現擴散限制，使用有一定難度

4.包埋法
優點：可進行大量的固定化；包埋膜可選用生物相容材料，并可做成任意大小；膠格包埋用膠可做成所需要的厚度與硬度
不足：僅可用于低分子量的底物，不適用于柱系統，反應常受擴散限制，不是所有單體材料與溶劑都適用于各種酶

酶固定化后一般穩定性增加，易從反應系統中分離，且易于控制，能反復多次使用。便于運輸和貯存，有利于自動化生產，但是活性降低，使用范圍減小，技術還有發展空間。固定化酶是近十余年發展起來的酶應用技術，在工業生產、化學分析和醫藥等方面有誘人的應用前景。

優點：
①固定化酶可重復使用，使酶的使用效率提高、使用成本降低。
②固定化酶極易與反應體系分離，簡化了提純工藝，而且產品收率高、質量好。
③在多數情況下，酶經固定化后穩定性得到提高。
④固定化酶的催化反應過程更易控制。
⑤固定化酶具有一定的機械強度，可以用攪拌或裝柱的方式作用于底物溶液，便于酶催化反應的連續化和自動化操作。
⑥固定化酶與游離酶相比更適于多酶體系的使用，不僅可利用多酶體系中的協同效應使酶催化反應速率大大提高，而且還可以控制反應按一定順序進行。

缺點：
①固定化可能造成酶的部分失活，酶活力有損失。
②酶催化微環境的改變可能導致其反應動力學發生變化。
③固定化酶的使用成本增加，使工廠的初始投資增大、
④固定化酶一般只適用于水溶性的小分子底物，對于大分子底物不適宜。
⑤與完整菌體細胞相比，固定化酶不適宜于多酶反應，特別是需要輔助因子參加的反應。
⑥胞內酶進行固定化時必須經過酶的分離純化操作